| 稿件标题： | pEGFPN1BMP2真核表达载体的构建及其经超声微泡介导转染HPDLFs后的表达 |
| 稿件作者： | 仲 琳，钟晓波，张云燕，等 |
| 关键字词： | 牙周再生；超声微泡；人骨形成蛋白2；增强型绿色荧光蛋白；基因转染；人牙周膜成纤维细胞 |
| 文章摘要： | 摘要：目的构建pEGFPN1BMP2真核表达质粒，并检测其经超声微泡转基因技术转染人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)后的瞬时表达情况。方法从人胎盘滋养层细胞系中提取总RNA,采用RTPCR方法获得目的基因人骨形成蛋白2(hBMP2)基因片段，连接pMD19T载体并测序正确后与真核荧光表达载体pEGFPN1连接，酶切鉴定后利用超声微泡转基因技术转染入HPDLFs中，通过荧光显微镜和RTPCR检测目的基因在HPDLFs中的表达。结果成功克隆人BMP2基因，重组质粒pEGFPN1BMP2经PCR及双酶切鉴定均证实hBMP2基因已与pEGFPN1正确重组。pEGFPN1BMP2经超声微泡转染HPDLFs后，通过绿色荧光观察和RTPCR检测证实hBMP2能够在体外培养的HPDLFs内有效的转录和瞬时表达。结论成功构建pEGFPN1BMP2真核表达载体，通过超声微泡转基因技术成功转染入HPDLFs并得到有效表达，为进一步研究该质粒与超声微泡转基因技术在牙周再生基因治疗中的应用提供实验基础。 |
| 杂志名称： | 重庆医学 |
| 文章刊期： | 2010年39卷09期 |
| 文章栏目： | 论著 |
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