| 稿件标题： | PKD1对HeLa 细胞中AP1的转录激活作用 |
| 稿件作者： | 邹志鹏,许万福，冯 丽,等 |
| 关键字词： | 蛋白激酶D1;AP1;siRNA;转录激活 |
| 文章摘要： | 摘要：目的研究蛋白激酶D1(PKD1)对人HeLa细胞中AP1转录激活作用，为探讨PKD1作用的AP1靶基因的功能作用奠定基础。方法首先将对照质粒pcDNA3.1、PKD1野生型质粒（pcDNAPKD1）或无激酶活性突变型质粒pcDNAPKD1DN与AP1转录活性报告质粒pAP1luc及内参照报告质粒pRLSV40共转染人HeLa细胞,同时将对照siRNA（siCTL）或PKD1 siRNA（siRNAPKD1）与AP1转录活性报告质粒pAP1luc及内参照报告质粒pRLSV40也共转染人HeLa细胞。转染48 h后，分别收集细胞裂解液进行Western blot 检测外源性PKD1过表达或内源性PKD1敲低状况，并以Promega双报告基因分析试剂盒测定AP1荧光素酶活性，计算AP1相对转录活性。结果Western blot证实HeLa细胞中外源性pcDNAPKD1、pcDNAPKD1DN过表达，而且siRNAPKD1明显敲低HeLa细胞中内源性PKD1表达；双色荧光素酶报告基因检测表明，与对照质粒pcDNA3.1比较，pcDNAPKD1过表达明显增强AP1转录活性（P<0.05），相反，与pcDNAPKD1比较，pcDNAPKD1DN过表达则明显降低AP1转录活性（P<0.05）。与之相符，与siCTL比较，siRNAPKD1对内源性PKD1敲低，也明显抑制AP1转录活性（P<0.01）。结论PKD1表达和激酶活性增强HeLa细胞中AP1转录激活，提示PKD1 可能通过AP1调控相关靶基因表达。 |
| 文章基金： | 国家自然科学基金资助项目；教育部留学回国人员科研启动基金资助项目；南方医科大学院长基金资助项目 |
| 杂志名称： | 重庆医学 |
| 文章刊期： | 2010年39卷15期 |
| 文章栏目： | 论著 |
| 相关信息： |
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