稿件标题: | 人颗粒溶素活性肽重组卡介苗的构建与表达 |
稿件作者: | 张 黎,杨 春,何永林,等 |
关键字词: | 颗粒溶素;重组卡介苗;真核表达 |
文章摘要: | 摘要:目的构建携带人颗粒溶素(GLS)活性肽的重组卡介苗(BCG),并鉴定该重组菌向真核细胞递呈质粒的能力。方法以分子生物学方法构建携带GLS活性肽基因和分支杆菌复制子OriM的真核穿梭共表达质粒pBMS,以电转化方式将pBMS质粒转入BCG构建重组BCG,抽提质粒进行PCR鉴定重组菌;将重组菌感染巨噬细胞,通过RTPCR了解重组菌向真核细胞递呈质粒的能力。结果采用电转化方式可将pBMS导入BCG,抽提质粒鉴定出与GLS基因相符的目的条带。以该重组BCG感染小鼠巨噬细胞,96 h后用RTPCR法可扩增出相应的基因条带。结论成功构建含pBMS的重组BCG。该重组BCG能向小鼠巨噬细胞递呈携带基因。 |
文章基金: | 重庆市自然科学基金重点资助项目 |
杂志名称: | 重庆医学 |
文章刊期: | 2010年39卷15期 |
文章栏目: | 论著 |
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