| 稿件标题： | MDA-7基因的腺病毒载体构建及对肺腺癌A549细胞凋亡的影响 |
| 稿件作者： | 李书华，龙 捷，王红艳，谢晓斌，张雅洁 |
| 关键字词： | 病毒复制； 基因疗法； 肿瘤/治疗； 复制缺陷型腺病毒； AdMax包装系统 |
| 文章摘要： | 【摘 要】 目的 构建一种由腺病毒AdMax包装系统表达目的基因——黑色素瘤分化相关基因-7（MDA-7）的复制缺陷型腺病毒，并初步探索其抗肿瘤活性。 方法 通过基因操作技术将目的基因（MDA-7）插入到5型腺病毒AdMax包装系统的E1A 区域，构建复制缺陷型腺病毒Ad.hMDA-7-EGFP；同时构建对照病毒Ad.EGFP。病毒滴度计算按寇化法（Karber法）进行腺病毒感染性滴度（TCID50）测定。应用免疫组化染色法检测MDA-7在感染2种病毒的肺腺癌A549细胞中的表达状态；通过二苯甲亚胺-碘化丙啶（Hoechst33342-PI）双染色法及流式细胞仪检测2种病毒对肿瘤细胞杀伤的差异。 结果 成功构建携带目的基因的腺病毒载体，经聚合酶链反应（PCR）鉴定正确；MDA-7在感染Ad.hMDA-7-EGFP的肺腺癌A549细胞中表达，以相同感染复数（MOI）值感染Ad.EGFP时肺腺癌A549细胞中未检测到MDA-7表达；Ad.hMDA-7-EGFP对肿瘤细胞株杀伤能力明显高于Ad.EGFP。 结论 成功构建复制缺陷型腺病毒Ad.hMDA-7-EGFP，并证实MDA-7蛋白在肿瘤细胞中过表达，诱导肺腺癌A549细胞株发生凋亡。 |
| 文章基金： | 教育部博士点基金项目博导类课题（20134423110001）；广东省自然科学基金资助面上项目（S2012010010181）；广东省医学科研基金项目（A2013244）；广州市科技计划项目（2014Y200171）；广州市教育系统创新学术团队项目（13C06）。 |
| 杂志名称： | 现代医药卫生 |
| 文章刊期： | 2014年30卷13期 |
| 文章栏目： | 论著 |
| 相关信息： |
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