| 稿件标题： | 小鼠原代成肌细胞分离、纯化及培养 |
| 稿件作者： | 熊 雷，何衍佶，戴 威，赵 圆，高彦飞，邓忠良，聂 茂 |
| 关键字词： | 【关键词】 成肌细胞； 细胞，培养的； 细胞分化； 微RNAs |
| 文章摘要： | 【摘 要】 目的 建立小鼠原代成肌细胞分离、纯化及培养方法，并诱导其成肌分化，检测成肌分化过程中微小 RNA-1（miRNA-1）和miRNA-155表达情况。 方法 提取新生小鼠后腿肌肉，经胶原酶消化，利用细胞贴壁差异性分离及纯化原代成肌细胞。使用含马血清的分化培养基诱导其成肌分化，通过肌球蛋白重链抗体——MF20免疫荧光染色鉴定成肌能力。使用Taqman实时定量聚合酶链反应检测原代成肌细胞分化过程中miRNA-1和miRNA-155表达情况。结果 成功分离并纯化小鼠原代成肌细胞；成功诱导原代成肌细胞向骨骼肌分化，MF20免疫荧光染色呈阳性。原代成肌细胞在成肌分化过程中miRNA-1表达明显上升，miRNA-155表达明显下降，差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 成功构建了提取小鼠原代成肌细胞的方法，为进一步研究成肌分化过程中miRNA基因调控提供了体外模型。 |
| 文章基金： | 基金项目：国家自然科学基金资助项目（81501867） 。 |
| 杂志名称： | 现代医药卫生 |
| 文章刊期： | 2017年33卷3期 |
| 文章栏目： | 论著 |
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