| 稿件标题： | 人骨形态发生蛋白-9基因修饰SD大鼠骨髓间充质干细胞的建立研究 |
| 稿件作者： | 向晓波，周艳萌，蒋 练 |
| 关键字词： | 【关键词】 骨髓； 间质干细胞； 转染； 大鼠，Sprague-Dawley； 骨形态发生蛋白质类； 基因 |
| 文章摘要： | 【摘 要】 目的 建立人骨形态发生蛋白-9（BMP-9）基因转染SD大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs），并观察其在细胞内的表达。 方法 采用全骨髓细胞贴壁法分离出BMSCs，利用流式细胞仪检测CD44、CD90、CD45、CD34细胞表面标记物；通过脂质体转染法将pDoubleEx-EGFP-BMP-9质粒、pDoubleEx-EGFP质粒转染入SD大鼠BMSCs，利用荧光显微镜、荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测BMP-9的转染效果。 结果 全骨髓贴壁培养法成功分离大鼠BMSCs，传代培养至第3代可获得较高纯度，CD44-FITC的阳性表达率为92.35%，CD90-FITC的阳性表达率为91.76%，CD34-PE的阳性表达率为2.68%，CD45-PE的阳性表达率为4.13%；荧光显微镜和倒置显微镜下观察，BMP-9基因修饰后细胞形态未发生变化；PCR检测发现pDoubleEx-EGFP-BMP-9转染组中大量表达BMP-9基因，是pDoubleEx-EGFP组的378 517.88倍；Western blotting结果显示，pDoubleEx-EGFP-BMP-9组中大量表达BMP-9蛋白，pDoubleEx-EGFP未见表达。 结论 全骨髓贴壁培养法可以成功分离BMSCs，BMP-9基因可以通过脂质体转染的方法转染入SD大鼠的BMSCs中并得到成功表达。 |
| 文章基金： | 基金项目：贵州省科研基金资助项目（黔科合J字LKZ〔2010〕03号） |
| 杂志名称： | 现代医药卫生 |
| 文章刊期： | 2017年33卷6期 |
| 文章栏目： | 论著 |
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