| 稿件标题： | 布鲁氏菌外膜蛋白Omp16的原核表达、纯化及多克隆抗体制备 |
| 稿件作者： | 熊流新，黄健，张涛，李晓婷，徐梅，陈昱希，陈安林，胡永林，闵迅 |
| 关键字词： | 【关键词】布鲁菌属；基因表达；Omp16；蛋白纯化 |
| 文章摘要： | 【摘要】目的克隆、表达、纯化布鲁氏菌Omp16重组蛋白，并制备多克隆抗体，评估其作为布鲁氏菌蛋白质疫苗的可行性。方法PCR法扩增全长及截短的布鲁氏菌Omp16基因，并将其克隆入pET28a（+）载体中；经菌液PCR和测序鉴定后，再转入大肠杆菌BL21（DE3）中，经异丙基硫代?β?D?半乳糖苷（IPTG）诱导表达及镍柱纯化后，获取高纯度的Omp16目的蛋白，然后将其免疫BALB/c小鼠以制备多克隆抗体，Westernblotting检测抗体的特异性免疫反应。结果成功构建了全长及截短表达的Omp16原核表达质粒，经IPTG诱导表达后，获得了全长及截短Omp16蛋白，免疫BALB/c小鼠后获得了高效价的抗Omp16多克隆抗体。Westernblotting实验证实2种Omp16重组蛋白（Omp16?1、Omp16?2）均能与其相应抗体发生特异性免疫反应。结论该研究成功克隆、表达、纯化了全长及截短的Omp16重组蛋白，2种Omp16重组蛋白均具有很好的免疫原性，且能与高滴度的小鼠多克隆抗体发生特异性结合，为后续以Omp16蛋白为基础的疫苗研发奠定了实验基础。 |
| 文章基金： | *基金项目：国家自然科学基金资助项目（81460317） |
| 杂志名称： | 现代医药卫生 |
| 文章刊期： | 2018年34卷5期 |
| 文章栏目： | 论著 |
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